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消除培養(yǎng)細胞污染的實驗步驟
日期：2025-05-09 15:53
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摘要：
下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟：
1、在無抗生 素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。
2、分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生 素加入到每一個孔中。例如，兩性霉素B推薦下 列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
3、每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。
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下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟：
1、在無抗生 素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。
2、分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生 素加入到每一個孔中。例如，兩性霉素B推薦下 列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
3、每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。
4、確定抗生 素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生 素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2～3代。
5、在無抗生 素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。
6、重復(fù)步驟4。
7、在無抗生 素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代，確定污染是否以已被消除。